GF-1 LR3, stutt fyrir Long R3 Insulin-like Growth Factor-1, almennt þekktur sem LR3 eða Long R3, er breytt útgáfa af innrænu IGF-1. Mannlegt IGF-1 hefur upphaflega 70 peptíð (7,6 kDa). Það hefur 13 amínósýrur (MFPAMPLSSLFVN…) harðfestar í N-endanum, og þriðja glútamatinu (Glu) hefur verið skipt út fyrir Arg, sem leiðir til 83-peptíðs, 9117.5 Da, CAS 946870-92-4.
Native IGF-1 er samstundis bundið af sex IGFBP (bindandi próteinum), með minna en 1% í lausu ástandi og helmingunartími- í plasma er aðeins 15 mínútur, sem gerir það afar erfitt að framkvæma langvirka-merkjagreiningu. Þessi breyting á LR3 dró verulega úr sækni þess í IGFBP um það bil 1000 sinnum, hámarkaði hlutfall frjálsra peptíða og lengdi helmingunartímann í 20–30 klukkustundir, á sama tíma og hún hélt sömu sækni í viðtakann (IGF-1R) og upprunalega, sem gerir það í rauninni að „óbundnu IGF-1“.
Binding IGF-1R (týrósín kínasi) → kallar fram tvær leiðir: PI3K/Akt/mTOR og MAPK/ERK. Þetta leiðir til ríbósómal S6K og 4E-BP1 fosfórunar, fullrar próteinþýðingar og bælingar á FoxO, sem leiðir til niðurbrots og nýmyndunar próteina. Þetta stuðlar að útbreiðslu og aðgreiningu myoblasts/C2C12, chondrocytes, CHO frumur og MSCs.
Kjarnarannsóknargildi (Ekki rangt lesa sem "vöðvavöxtur með einni inndælingu"):
Langvirkur IGF-1R rannsakandi: Stöðug viðtakanýting í sermi/IGFBP-innihaldandi kerfum, verulega hreinni en upprunalega IGF-1 hvað varðar lengd merkja, niðurstýringu viðtaka og mTOR-hvörf.
Sermi-ókeypis/lítið-gull samstarfsaðili í sermiræktun: Repligen's LONG R3 IGF-I er iðnaðar-uppbót, hindrar frumudauða og eykur CHO/MSC þéttleika, býður upp á meiri stöðugleika og lægri kostnað en insúlín.
Approximately 3 times the in vitro potency of the original IGF-1, requiring less dosage; however, high concentrations (>200 ng/mL) getur í raun dregið úr viðtaka innfrumumyndun og stuðlað að útbreiðslu blóðflagna; hærri styrkur er ekki alltaf betri.
Varúðarorð: Þetta er ekki klínískt lyf; það hefur ekki verið samþykkt af FDA og WADA flokkar það í gráa svæðið fyrir peptíð. „50-100 ug brottnám undir húð“ meðferðin sem notuð er í líkamsræktarsamfélaginu er samfélagsskammtur, ekki rannsóknaraðferð. Ennfremur er IGF-1R sjálft tengt æxlisfjölgun og langtíma misnotkun hefur verulega fræðilega áhættu í för með sér.
Geymsla (Hvarfefni frostþurrkað duft, 9 kDa prótein er ekki lítið peptíð)
Óblandað frostþurrkað duft: Geymið við -20 gráður, lokað, varið gegn ljósi og með þurrkefni í 1-3 ár. Geymsla við -80 gráður er stöðugust. Geymið ekki við 4 gráður til langs tíma og ekki við stofuhita.
Blönduð stofnlausn: Flest vörumerki mæla með upphaflegri blöndun með sæfðri 0,1% ediksýru (pH 3,5–4,5) (bein upplausn með hlutlausu vatni mun valda samloðun!), styrkur 0,1–2 mg/ml; Geymsluþol er aðeins 2–7 dagar við 2–8 gráður. Fyrir langtíma geymslu verður það að vera í skammti með hleðsluefni (0,1% BSA / 5% HSA / 5% trehalósa / 10% FBS). Einn skammtur við -80 gráður getur varað í 3–12 mánuði.
Vinnulausn: Þynnt með PBS eða heilum ræktunarmiðli sem inniheldur 0,1% BSA. Geymið í stuttu máli í frumuræktarherbergi við 4 gráður. Forðastu endurteknar frystingar-þíðingarlotur.
Varúðarráðstafanir:
Miðja við 8000–12000 g í 30 sekúndur áður en opnað er. Fyrir 9 kDa prótein frostþurrkað, límdu flöskuna við vegginn og tappann. Ekki bæta við vatni beint án skilvindu; „ósýnilega duftið“ neðst á flöskunni eru peningar.
Fyrir fyrstu upplausn, notaðu 0,1% ediksýru til að hrynja hægt meðfram frumuveggnum, forðast hringiðu. Hver hringhringur mun skekkja sköpulag um helming. Blandið hægt saman með því að snúa/hvolfa rörinu þar til það er glært og litlaus. Fargið hverri lausn sem er þokukennd eða flókin, þar sem samanlagðir LR3 viðtakar munu hafa enga bindisækni.
Lágur styrkur veldur of miklu aðsogs að rörveggnum: Þegar vinnustyrkurinn er 1–100 ng/mL, ekki nota 0,1% BSA sem burðarefni eða lítið-aðsogsrör. Raunverulegt magn sem bætt er við holurnar mun aðeins vera 30–50% af nafnstyrk, sem leiðir til skelfilegrar innanfrumurúmmálslosunar (CVs).
pH næmi: Ekki má bæta ediksýru stofnlausn beint við frumur (pH lost drepur frumur). For-þynntu að minnsta kosti 1:100 í hlutlausan jafnalausn sem inniheldur BSA áður en því er bætt við ræktunarkerfið.
CoA vöktun: HPLC Stærra en eða jafnt og 98%, MS staðfesting 9117,5 Da, endotoxín<0.01–1 EU/μg (stricter requirements for cell therapy-grade MSCs); oxidized Met or its truncated form are latent antagonists. RUO label: The label reads "Research Use Only, not for human use," indicating it's not a legally approved drug for human injection; it's for internal use within the IACUC system. Don't mistake peptide suppliers for pharmacies.
Fyrir útbreiðslutilraunir eru þrír viðmiðunarhópar nauðsynlegir: ógild sermisstýring + upprunaleg IGF-1 jafnmólstýring + IGF-1R hemill (picropodophyllin/OSI-906). Annars er óljóst hvort LR3 er virka innihaldsefnið eða aðrir þættir í sermi eru að stuðla.
maq per Qat: Sérhæfð líkamsbyggingar peptíð lyf IGF1-LR3 0.1mg/hettuglas 1mg/hettuglas, Kína Sérhæfð líkamsbyggingar peptíð lyf IGF1-LR3 0.1mg/hettuglas 1mg/hettuglas framleiðendur, birgjar, verksmiðja
